第46章 微生物的培养基(1 / 2)

知识讲解

培养基(medium):是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。一、培养基的类型及应用

培养基种类繁多,根据其成份、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。

1.按成份不同划分

(1)天然培养基:以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成优点:营养丰富且较经济,配制方便

缺点:成分不清楚,不稳定

应用:实验室及实际生产

(2)组合培养基:是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基,也称化学限定培养基(chemically defined medium)。高氏一号,查氏培养基

优点:组分清楚,重演性高

缺点:价格昂贵,配制麻烦,生长较慢

应用:营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定等对定量要求较高的研究工作

(3)半组合培养基

既含有天然成分又含有纯化学试剂的培养基即称半组合培养基。例如,培养真菌用的马铃薯蔗糖培养基等。严格地讲,凡含有未经特殊处理的琼脂的任何组合培养基,实质上都只能看作是一种半组合培养基。

2.根据物理状态划分:

(1)固体培养基;用于微生物菌种分离、鉴定、计数、保藏。加1.5%—2%琼脂或5%—12% 明胶。

理想凝固剂应具备的条件:不被微生物分解、利用、液化;不因消毒灭菌而被破坏;在微生物的生长温度内保持固态;凝固点的温度对微生物无害;透明度好,粘着力强。

(2)液体培养基:在科研或生产中通过发酵获得菌体或代谢产物,在生产实践上,绝大多数发酵培养基都采用液体培养基。

(3)半固体培养基:0.5% 琼脂。观察微生物运动特征、厌氧菌的培养等。

(4)脱水培养基:营养琼脂、营养肉汤、M17肉汤、麦康凯培养基等。

3.按用途划分

(1) 基础培养基

尽管不同微生物的营养需求各不相同,但大多数微生物所需的基本营养物质是相同的。基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。牛肉膏蛋白陈培养基是最常用的基础培养基。基础培养基也可以作为一些特殊培养基的基础成份,再根据某种微生物的特殊营养需求,在基础培养基中加入所需营养物质。

(2)加富培养基

加富培养基也称营养培养基,即在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基,这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。加富培养基一般用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物,如培养百日咳博德氏菌(Bordetella pertussis)需要含有血液的加富培养基。加富培养基还可以用来富集和分离某种微生物,这 是因为加富培养基含有某种微生物所需的特殊营养物质,该种微生物在这种培养基中较其他微生物生长速度快,并逐渐富集而占优势,逐步淘汰其他微生物,从而容易达到分离该种微生物的目的。从某种意义上讲,加富培养基类似选择培养基,两者区别在于,加富培养基是用来增加所要分离的微生物的数量,使其形成生长优势,从而分离到该种微生物;选择培养基则一般是抑制不需要的微生物的生长,使所需要的微生物增殖,从而达到分离所需微生物的目的。

(3) 鉴别培养基

鉴别培养基是用于鉴别不同类型微生物的培养基。在培养基中加入某种特殊化学物质,某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物,而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化.根据这种特征性变化.可将该种微生物与其他微生物区分开来。鉴别培养基主要用于微生物的快速分类鉴定,以及分离和筛选产生某种代谢产物的微生物菌种。

(4)选择培养基

选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同,在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质,抑制不需要的微生物的生长,有利于所需微生物的生长。

(5)生产用培养基

在生产实践中经常使用孢子培养基、种子培养基和发酵培养基。

②孢子培养基 孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基,对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长,产生较多优质的孢子,并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。基本配制要求是:营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子;无机盐浓度适当,否则影响孢子的颜色和数量;培养基的湿度和pH也会对孢子产量产生影响。生产上常用的孢子培养基有:肤皮