【知识目标】

1.了解微生物生长的概念。

2.理解环境条件对微生物生长的影响和控制方法，工业上常用的微生物培养技术。

3.掌握几种常用的微生物生长量的测定方法，微生物的生长曲线及对生产实践的指导意义，微生物的诱变育种和常用的微生物菌种保藏的方法。

【技能目标】

1.能够运用微生物生长量的相关理论知识，完成微生物生长量的测定。

2.能够运用微生物生长规律的相关理论知识，完成微生物生长曲线的绘制，并学会如何运用微生物的生长曲线来指导生产实践。

什么是微生

什么是微 物的繁殖？ 生命个体生长到一定阶段

生 ，通过特定方式产生新的

生命个体，即引起生命个

物的生长 微生物细胞吸收营养物 体数量增加的生物学过程

质，进行新陈代谢，当

同化作用＞异化作用时

生命个体的重量和体

积不断增大的过程。

微生物生长的表示方法

＞个体生长：微生物生长

群体生长：微生物生长+ 微生物繁殖

＞由于微生物的个体极小，所以常用群体生长来反映个体生长的状况：个体生长一个体繁殖→群体生长。

＞ 群体生长=个体生长+个体繁殖

微生物生长量测定

评价培养条件、营养物质等对微生

物生长的影响；

评价不同的抗菌物质对微生物产生

抑制(或杀死)作用的效果；

客观地反映微生物生长的规律；

单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的变化

测定生长量法

测体积法

直接法测定生长量

称干重法

生理指标法

比浊法

间接法测定生长量

1、直接法

测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法

测体积法 称干重法

粗放型，在刻度离心管中测沉降量。

在精确型，离心法和过滤法获得菌体细胞，

微生物的干重一般为其湿重的10%~20%

测干重法

测体积法 将细胞培养液离心或过滤后，洗淡除去培养基成分后转

刻度离心管中离心，测定沉淀多少来确定微生物的生长情况 移到适当的容器，置100~105C干燥箱烘干或低温低压

干燥(60~80℃)至恒重后，称重。

比浊法 生理指标法

用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行 一种特定的微生物，每一个细胞中的ATP

测定，一般选用450~650nm波段。 浓度几乎是一个常数，所以测定这种微生

物的ATP含量，即可知其细胞数。

计繁殖数法

计繁殖数直接法

计繁殖数间接法

单细胞状态的细菌和酵母菌

计算细胞个体的数目

放线菌和霉菌等丝状生长的微生物计算其孢子数

其中最重要的是计数板计数法。：

计数板直接计数方法

1.计数板直接计数

指采用计数板(细菌计数板或血球计数板)，

2.染色后活菌计数 在光学显微镜下直接观察微生物细胞并进行计数法 的方法。（计算一定容积里样品中微生物的数

3.比例计数法 量)

4.过滤计数法

1.计数板直接计数方法——计算细胞个数

缺点：

不能区分死菌与活菌；

不适于对运动细菌的计数；

需要相对高的细菌浓度；

个体小的细菌在显微镜下难以观察。

2.染色后活菌计数法

采用特定的染色技术进行活菌染色，然后用光学显微镜计数的方法。可分别对活菌和死菌进行计数。

例：美蓝 →酵母→ 活细胞→无色

死细胞→蓝色

二、计繁殖数间接法

是一种活菌计数法，这是一种依据活菌在液体培养基中会使其变混或在固体培养基上(内)形成菌落的原理而设计。

最常用的是菌落计数法(colony-counting methods)

1.平板菌落计数法

可用浇注平板(pour plat