第50章 微生物培养基的制备(1 / 1)

培养基(medium):nonono是人工配制的,适合微生物生长繁殖usjdbn或产生代谢产物的营养基质。培养基的配制步骤和方法(以营养琼脂培养基为例):然后呢

目的:掌握培养基的ishhdn配制方法rhhajj、步骤和技术,并能熟练配kshzbxn制各种培养基。就是这样

营养琼脂培养基是人工配制的适合细菌生长繁殖或积累代谢jsjdnnd产物的营养基质,是一种应用最广泛和最普通的细菌基本培养基;其含有牛肉膏,蛋白陈、NaCL和琼脂,以利于细菌的jshevbdn生长繁殖。其中牛肉膏为细菌的生长提供碳源、能源、磷酸jdhdbbdn盐和维生素;蛋白胨提供氮源和维生素;NaCL提供无机盐;琼脂作为凝固剂。没错

配制时需要准备的药sjbdbdbn品和器材有:营养琼脂培养基粉(配方:牛肉膏3g、蛋白陈10g、NaC5g、琼脂15g、溶于1000毫升蒸馏水中,pH7.3±1),jdhdhbdn称量用的天平、药匙、称量纸:溶解用的烧杯、量筒、玻棒、电炉;过滤装置;分装和包扎用的三角瓶、试管、棉塞、牛皮纸、棉线、记号笔。

配制的基skjdbdb本步骤包括snbdjdm称量、溶解、过jshxbnx滤、分装、加塞和包扎:

第一步:称量根据所需配制的培养基的体积数用分析天平nsbxbxnk称量所需的jdjdhbd营养琼脂粉量。称量时要注意以下几点:称量前天平要进行预热和校正;称量时用称量纸进行称量ishdbdn,称量纸要进行去皮;药匙要干净,避免ushsbdm污染;称量速度要快,避免吸潮;称量完毕后及时盖上试剂瓶盖。

1/2第二步:加热溶解 先向烧杯内加入所需水量的一部分,将培养基连同称量纸一起放入烧杯中,于电炉上稍微加热后,待培养基脱离称量纸后用玻璃棒挑出称量纸,然后边加热边不断进行搅拌,直到培养基完全溶解后补足水分继续加热至微沸即可。注意:电炉上要垫石棉网,以防烧杯受热不均匀易破裂;要边加热边搅拌,以防琼脂糊底烧焦。

第三步 过滤过滤的目的是除去培养基里面的漂浮物和微小颗粒杂质,以利于某些实验结果的观察。用纱布趁热将已溶解的培养基过滤。要求:趁热进行过滤;纱布最好叠六层,这样过滤效果较好;过滤后的培养基应透明无沉淀。

第四步分装将培养基趁热加至漏斗上进行分装。如果要制作平板培养基,则须将培养基分装于三角瓶内,一般以其容积的1/2为宜;如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中,装试管时,装量不要超过试管的1/5。注意分装时管口或瓶口不要沾上培养基。

第五步 加塞 分装完毕后,用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。棉塞应采用新鲜、干燥的普通棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞,管、瓶不下落;拔出塞子时能听到“嘭”的一声为合适。

第六步包扎 包扎的目的是防止灭菌时冷凝水润湿棉塞。试管包扎:加塞后先用棉线捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸,其外再用一道棉线以活结形式扎好,注明培养基名称,配制日期,待灭菌;锥形瓶包扎:加塞后,外包牛皮纸,用棉线以活结形式扎好,注明培养基名称,配制日期,待灭菌。

总结:以上内容就是营养琼脂培养基的配制步骤,现在总结一下基本内容:配制分为六个

步骤:称量、溶解jshdnmd、过滤、分装、加塞、灭菌,除了要注意每一步的操作要点外,还要注意以下几点:药品称量要准确;用玻璃或不锈钢器皿溶解培养基,忌用铁质或铜制容器;一定要边溶解边搅拌,防止琼脂糊底烧焦;分装的体积要适宜;棉塞要松紧合适。

培养基配制完毕后要进行下一个单元的操作:培养基的灭菌、搁置斜面和无菌检查技术。

为了更好的学习下个单元的内容,故课后请思考以下几个问题:

1、培养基配好后,为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是无菌的?

2、高压蒸汽灭菌的原理是什么?是否只要压力表上的指针指到所需的压力时就能达到所需灭菌温度?为什么?

3、管口、瓶口能否用木塞或橡胶塞代替?为什么?