第47章 微生物的培养基(2)(1 / 1)

3.物理化学条件适宜:

(1)pH:

通常培养条件:细菌与放线菌:pH 7~7.5

酵母菌和霉菌:pH 4.5~6

pH变化的原因:

糖类→发酵、氧化→有机酸→变酸

脂肪→水解→有机酸→变酸

(NH4)2SO4→吸收 NH4+→H2SO4→变酸

蛋白质→脱竣→胺类→变碱

NaNO3 →吸收NO3-→NaOH→变碱

内在调节:K2HPO4和KH2PO4是常用的缓冲剂

不溶性 CaCO3作为备用碱

外源调节:不断流加酸液或碱液

(2)氧气:

好 氧:振荡、通气、搅拌

厌氧:加还原剂(抗坏血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽等)

例:厌氧菌培养基:蛋白豚 5g,酵母膏 10g,葡萄糖 10g,胰酶解酪蛋白 5g,盐溶液10mL,

0.025%刃天青 4mL,半胱氨酸盐酸盐 0.5g.琼脂 15g.水 1000mL,pH7.0. 121℃,20min

半胱氨酸为还原剂,刃天青是氧化还原指示剂,具有双重作用:有氧条件下起pH指示剂的作用,即碱性时呈蓝色,酸性时呈红色;培养基处于无氧状态时,刃天青变为无色

(3)渗透压:加入适量 NaCl 调节渗透压

例:L 型细菌加 3%—5%NaCl或10%—20%蔗糖

4. 经济节约:当所设计的是大规模发酵用的培养基时,应重视培养基中各成份的来源和价格,应选择来源广泛、价格低廉 的原料,提倡以粗代精,以废代好。

例:某制药厂改进链霉素发酵液中的原有配方,设法减去30-50%的黄豆饼粉、25%的葡萄糖和20%硫酸铵,结果反而提高了产量。

(二)四种方法

1.生态模拟

在自然条件下,凡有某微生物大量生长繁殖的环境,则可认为该处一定具备该微生物生长繁殖所必需的营养和其他条件。因此,就可以模拟该天然基质或直接取用该天然基质(经过灭菌)来培养相应的微生物。在实践中,的确可以利用生态模拟的办法来配制各类“初级的”天然培养基。例如,可用肉汤、鱼汁来培养多种细菌;用水果汁来培养各种酵母菌;用润湿的皮、米糠来培养多种霉菌;用米饭或面包来培养根霉;用肥土来培养放线菌;以及用玉米芯来培养脉孢菌(Neurosporaspp.),等等。

2.查阅文献

一个科学工作者决不能事事都依靠直接经验,多查阅、分析和利用一切文献资料上的对自己直接或间接有关的信息,对设计有自己特色的培养基配方有着重要的参考价值。

3.精心设计

在设计、试验新配方时,常常要进行各项因素的比较或反复试验,因此,工作量是很大的。为了提高工作效率,应努力借助优选法或正交试验设计法等行之有效的数学工具。

4.试验比较

要设计一种优化的培养基,在上述三个方法的基础上,最终还得通过实际试验和比较来加以确定。试验的规模一般都遵循由定性到定量、由小而大地逐步扩大的原则。例如,可先在培养皿上作生长谱试验,然后进行摇瓶培养试验,再进行台式发酵罐试验,最后才扩大到试验型发酵罐和生产型发酵罐的规模。